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CDP-Star是个什么东东
  2018/9/11  浏览 1024 次
      目前,在国内的免疫分析技术中,化学发光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay CLIA)因其灵敏度高、特异性强、检测范围宽、可自动化检测等优点,逐渐取代酶联免疫分析技术(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)应用于临床检验。在各种CLIA方法中,其中的核心无疑就是各种发光物质。本文就对各项发光物质进行简单的介绍。
一、吡啶类化合物
      
      吡啶类化合物使用的代表为三联吡啶钌[Ru(bpy)3 ]2+。主要应用厂家为罗氏电化学发光(Electro Chemiluminescence Immunoassay)。其发光原理主要是以发光物质标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生的特异性化学发光反应;在电场中发光物质可以不断得到TPA提供的电子可以周而复始的发光,持续时间长。其方法优点在于:发光强度高使得试剂灵敏度高、容易测定且容易控制、稳定性好[1]。但是其试剂和仪器成本及维护费用高、贯流池易携带污染等情况也是实际应用中需要考虑的因素。

二、鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物
      鲁米诺(luminol) 、 异鲁米诺(isoluminol) 及其衍生物是最早在CLIA中使用的一种常用的化学发光物质,目前使用的厂家主要是索灵、强生等。其发光为氧化反应发光,需要辣根过氧化物酶(HRP)在碱性条件下催化,被H2O2氧化成激发态中间体,中间体回到基态时发出光子。鲁米诺本身发光时间短,为闪光型发光;且发光信号弱,所以一般需要加入增强剂来增强发光强度和延长发光时间[2]。但是,增强剂的加入使得反应体系变得复杂,有可能出现不确定的结果;另外,溶血和黄疸样本中的血红素基团和胆红素具有过氧化物酶活性,容易与HRP反应造成假阳性结果[3]。当然,鲁米诺类化学发光物质也有低成本、水溶性好等特点。

三、吖啶类发光物质
      
      应用最广泛的为吖啶酯和吖啶磺酰胺[4],代表厂家有雅培和西门子Centaur系列。吖啶酯发光反应简单快速,不需要催化剂,只需在碱性条件下加入H2O2后即可发出光子。该类发光提高信噪比,干扰小,且发光效率高,发光强度大,灵敏度高。但是发光为闪光型,对仪器信号检测部位要求较高,提高了仪器使用成本[5]。

四、1,2-二氧杂环丁烷类
      通常称之为金刚烷类衍生物,是一类高效发光剂,主要的发光物质有AMPPD和CDP-Star等。其中贝克曼和西门子IMMULITE使用AMPPD,希森美康HISCL平台使用CDP-Star。此类发光反应为水解反应,需要碱性磷酸酶(ALP)在碱性条件下催化其发出光信号。其发光强度大,持续时间长,检测灵敏度高[6]。

      对于化学发光体系来说,选择理想的发光物质无疑是十分重要的。例如Sysmex公司推出的HISCL平台,使用的是CDP-Star。CDP-Star是目前最理想的ALP酶解发光底物,较AMPPD 稳定; 非酶解性的水解程度更低; 酶解速度更快 ,达到最大光信号只需要相当于AMPPD 时间的一半; 且发光信号更强[6][7]。

      发光信号更强,那么最终的免疫复合物的生物量需求变少,所以在保证灵敏度的同时,可以适当的减少样本量,样本量的减少,可以满足儿童微量血检测以及临床的重测,多项目检测等需求。

      样本量减少同时还可以降低非特异性反应的发生,结合HISCL平台独有的脱磁清洗技术,可以有效降低假阳和灰区结果出现频率。例如,杜丽枝、林勇平等人挑选A厂家检测HCV-Ab结果灰区假阳样本161例,上机HISCL平台后,发现只有23例阳性结果,假阳性率下降85.7%[8]。

      综上,化学发光物质是应用化学发光技术的前提和基础,发现和应用新型的化学发光物质及化学发光体系,推动更好的发光应用与其他技术联用仍将是未来发展的趋势,并进一步促进化学发光技术在不同领域的应用。




【参考文献】
[1]临床医学检验与技术(中级). 人民卫生出版社. 2016(1):490.
[2]邵晓东,李瑛.鲁米诺化学发光分析法研究进展[J]. 化学研究,2010,21(1):102-111.
[3]王强,王东生,卢小岚等. 三种方法在不同状态低值血清HIVAg/Ab筛查中的效果评价[J]. 中国热带医学,2017,17(5):460-463.
[4]庞彬彬,孙海鹰,徐云根. 化学发光试剂的研究新进展[J].化学试剂,2017,39(9):942-948.
[5]沙栩正,邹应全. 化学发光酶免疫分析进展[J]. 理化检验-化学分册,2101,46(3):336-340.
[6]尹东光,贺佑丰,刘一兵等.几种主要化学发光物质的发光性能及其化学发光免疫分析体系[J].标记免疫分析与临床,2002,12(9):225-230.
[7]CorinneE. M. Olesen, Jennifer Mosier, Chris S. Martin, John C. Voyta, Irena Bronstein.1,2-Dioxetane chemiluminescent detection of proteins and nucleic acids[J].Jpn JElectroph. 1998; 42: 265-279.
[8]杜丽枝,林勇平,向波等.化学发光法检测丙型肝炎病毒抗体灰区标本的假阳性[J].热带医学杂志. 2017,17(7):855-858.

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